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動(dòng)物細胞培養試驗中添加動(dòng)物血清有哪些作用

很多時(shí)候都需要做細胞培養實(shí)驗,這樣對人們是有著(zhù)很大的幫助。不過(guò)很多時(shí)候在做動(dòng)物細胞實(shí)驗的時(shí)候都會(huì )添加一些動(dòng)物血清,不過(guò)很多人都不了解這樣做有何意義。那就讓小編來(lái)介紹介紹動(dòng)物細胞培養試驗中添加動(dòng)物血清有哪些作用?

一、血清及其成分

血清是血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周?chē)龀鲋S色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。從成分上看動(dòng)物血清的成分主要包括:水90.7 血清白蛋白4.4血清球蛋白2.1氨基酸氮0.005 尿素氮0.012其他非蛋白氮0.025葡萄糖0.08乳糖0.025各種脂肪酸0.38脂肪0.14卵磷脂0.2膽固醇0.22鈉離子0.38鉀離子0.02鈣離子0.01鎂離子0.0035 亞鐵離子0.0001氯離子0.36磷酸氫根離子0.0l硫酸根離子0.001碳酸氫根離子0.17DPG SGOT 各種激素酶堿基各種氨基酸(以上數據均為百分比)。從成分上看血清在動(dòng)物細胞培養中的作用是很復雜的。

二、各成分的功能

1.可以起到營(yíng)養物質(zhì)的作用

動(dòng)物在代謝的過(guò)程中所需的營(yíng)養包括水、無(wú)機鹽、維生素、糖類(lèi)、脂肪、氨基酸和纖維素等。這些成分動(dòng)物血清都可以提供給體外培養的動(dòng)物細胞,但這些營(yíng)養物質(zhì)(除水以外)的含量在動(dòng)物血清中所占的比例很少,而且主要的營(yíng)養物質(zhì)在動(dòng)物細胞培養基的配制中已經(jīng)添加了。所以,從這些角度看動(dòng)物細胞培養加入的動(dòng)物血清雖然能起到為培養的動(dòng)物細胞提供營(yíng)養物質(zhì)的作用,但這并不是主要的作用。

2.可以起到調節的作用

動(dòng)物細胞的代謝離不開(kāi)調節。在動(dòng)物體內有兩種調節方式來(lái)維持動(dòng)物代謝的穩定,而細胞本身的代謝調節中激素調節的作用很關(guān)鍵。血清中提供了適量且比例適中的各種各樣的激素來(lái)保證動(dòng)物細胞離體后的正常代謝。

3.可以為動(dòng)物細胞提供必需物質(zhì)

在微生物的培養中要為培養的微生物提供生長(cháng)因子。同樣動(dòng)物細胞代謝過(guò)程中有很多物質(zhì)是動(dòng)物細胞所必需而自身無(wú)法合成的的,例如堿基、維生素、氨基酸等微量物質(zhì),它們的作用非常重要,細胞需要它們合成核酸和蛋白質(zhì),缺乏要導致細胞生長(cháng)不良甚至死亡;提供結合蛋白,能識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質(zhì)活力; .提供對維持細胞指數生長(cháng)的激素,基礎培養基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養物,以及主要的低分子營(yíng)養物。這些物質(zhì)都存在于血清中,如果在配制培養基的時(shí)候一項項添加是非常麻煩的。所以加入動(dòng)物血清類(lèi)似微生物培養中的天然培養基的做法,簡(jiǎn)單方便、效果好。

4.可以為離體的動(dòng)物細胞提供能量及解毒功能

血清中存在大量的糖類(lèi)、脂類(lèi)物質(zhì),這些物質(zhì)可以為動(dòng)物細胞提供大量的能量。有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用。

5.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質(zhì)上所需因子來(lái)源動(dòng)物細胞培養的一個(gè)很重要的用途就是用取自燒傷病人皮膚的健康細胞進(jìn)行培養,可以獲得大量自身的皮膚細胞,為大面積燒傷的病人移植。人工皮膚的制備需要培養的細胞貼附在薄膜上形成皮膚組織,血清就為這個(gè)過(guò)程提供所需因子。

6.起酸堿度緩沖液作用

在動(dòng)物血清中存在豐富的無(wú)機鹽,還具有很多緩沖物質(zhì),在培養基的酸堿度發(fā)生變化時(shí)起到緩沖作用。

7.提供蛋白酶抑制劑

使在細胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害??傊?,動(dòng)物血清是細胞培養中用量大的天然培養基,含有豐富的細胞生長(cháng)必須的營(yíng)養成份,具有極為重要的功

能,更重要的是它含有細胞生長(cháng)所必須的生長(cháng)因子、激素、貼附因子等,這是合成培養基所無(wú)法替代的。此外它還能中和有毒物質(zhì)的毒性。故一般體外培養細胞時(shí)要加入一定量的小牛血清(10% ~20%)。
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