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怎樣分辨胎牛血清質(zhì)量的好壞

    以前科技不行,很多產(chǎn)品還是有一定的缺點(diǎn)。而現在科技有了很大的進(jìn)步,產(chǎn)品都慢慢完善了。胎牛血清現在種類(lèi)眾多,很多人都很難分辨出質(zhì)量的好壞,這就讓人們購買(mǎi)有難度了。畢竟買(mǎi)到劣質(zhì)的胎牛血清會(huì )很吃虧,這點(diǎn)必須注意。那么要怎樣分辨胎牛血清質(zhì)量的好壞?

    一、外觀(guān)

    拿到血清,先接觸的是血清外觀(guān),對于缺少細胞培養經(jīng)驗的人來(lái)說(shuō),外觀(guān)的判斷尤為重要

    1、顏色

    根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl,實(shí)際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無(wú)直接影響,這個(gè)指標的意義在于能體現出采血過(guò)程的嚴謹規范程度,良好的操作能降低血清的溶血。

    國產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散,大多是由屠戶(hù)采血后馬上離心收集,所以很少會(huì )有溶血,表現出明亮的蠟黃色,當然,國產(chǎn)血清也很少有標準意義上的胎牛血清。

    進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。

    總的來(lái)說(shuō),國產(chǎn)的血清呈現出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量好的呈現出談黃、微紅色,如Gibco16000,差點(diǎn)的呈現出橘紅色或鮮紅色。當然,熱滅活血清或保存不當的血清,由于血紅蛋白的破壞氧化,會(huì )呈現出暗紅,甚至咖啡色。

    2、沉淀

    很多血清客戶(hù),會(huì )發(fā)現進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題,這是沒(méi)有根據的。

    血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠(chǎng)家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。

    國產(chǎn)的血清,大多來(lái)自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好,從采血、冷凍、運輸到生產(chǎn)會(huì )經(jīng)過(guò)多次凍融,每次凍融過(guò)程,就會(huì )析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而更加的干凈,很少有沉淀產(chǎn)生。

    進(jìn)口的胎牛血清,過(guò)濾分裝前很少會(huì )反復凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,但隨著(zhù)時(shí)間的推移,血清中的大量纖維蛋白會(huì )析出形成沉淀。當然,進(jìn)口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會(huì )渾濁,甚至有大量沉淀。

    當然,購買(mǎi)回來(lái)的血清都是冰凍狀態(tài),使用時(shí)需要融化,融化過(guò)程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對細胞的顯微觀(guān)察有一定的阻礙。

    3、澄清度

    進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低,表現為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因為絕大多數是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進(jìn)行對比,可容易分辨。

    二、主要技術(shù)指標

    目前國內血清的質(zhì)量標準是2005版的《中華人民共和國藥典》,主要指標有以下幾點(diǎn):

    1、內毒素標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產(chǎn)一系列過(guò)程中的無(wú)菌操作情況。目前,國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求,很多進(jìn)口胎牛血清內毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清質(zhì)量也未見(jiàn)影響??梢?jiàn),內毒素含量偏高不影響質(zhì)量,除非含量極高,預示著(zhù)已經(jīng)污染。

    2、總蛋白含量

    胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說(shuō)明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。

    3、血紅蛋白標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。

    4、pH國產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。

    5、微生物包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類(lèi)病原性病毒等。隨著(zhù)國內血清廠(chǎng)家生產(chǎn)條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入,又無(wú)法過(guò)濾,很難徹底清除,但對血清質(zhì)量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類(lèi)微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。

    6、免疫球蛋白國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出采血的時(shí)的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。

    7、其它不管是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測抗生素的(無(wú)四環(huán)素胎牛血清除外)。國外,抗生素的使用很?chē)栏?,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內,抗生素的濫用已成了普遍現象,血清中殘留很高,對細胞培養極為不利,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。

    三、血源

    市場(chǎng)上的血清血源主要分為中國、北美、南美和澳洲。

    1、國產(chǎn)血清質(zhì)量差,這是公認的,主要原因并不是生產(chǎn)廠(chǎng)家的責任,而是天然環(huán)境差和抗生素的大量使用。國內環(huán)境污染嚴重,同時(shí)飼養過(guò)程中抗生素極其濫用,有毒有害物質(zhì)會(huì )大量殘留在血清中,終不利于細胞的生長(cháng)。

    2、南美血清,來(lái)源很多,如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏拉圭、巴西等,這些血清由于采血的不可控性,質(zhì)量參差不齊,當然,相對于國內血清來(lái)說(shuō)好的多。另外,國內銷(xiāo)售的南美血清大多顏色鮮紅,如Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,這可能和各國的采血、生產(chǎn)工藝有關(guān)。

    3、北美血清,主要來(lái)自美國和加拿大,如Hclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。這類(lèi)血清,等級越高的顏色越淡,表現為淡黃中帶一點(diǎn)微紅,SH30070和SH30396對比就很明顯,特級胎牛血清基本就能進(jìn)行干細胞培養。北美血清還有一個(gè)顯著(zhù)特點(diǎn)就是每瓶血清都能溯源,這對一些大型的疫苗廠(chǎng)、藥廠(chǎng)尤為重要。

    4、澳洲血清,來(lái)源主要是新西蘭和澳大利亞,這是在北美血清禁運之后進(jìn)入中國市場(chǎng)的,一般不具有溯源功能,由于生產(chǎn)、運輸等原因,價(jià)格相對來(lái)說(shuō)比較貴
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